O que é a coloração simples? Principais recursos

O coloração simples É um procedimento rápido e simples de coloração, no qual um único corante é usado, por isso é chamado de simples. É usado principalmente para determinar a morfologia e organização das células presentes em uma amostra.

Naturalmente, as células não têm cor, por isso é necessário torná-las visíveis de alguma forma quando são observadas no microscópio.

É importante enfatizar que os corantes usados ​​na coloração simples devem ser básicos com uma carga positiva (catiônica), de modo que possam se ligar espontaneamente à parede celular e ao citoplasma.

Essas estruturas celulares são carregadas negativamente. É por isso que o corante, positivamente carregado, é atraído para as células e se liga a elas espontaneamente. Assim, todas as células presentes em uma amostra são rapidamente coloridas.

Corantes utilizados em coloração simples

Existem vários corantes básicos que podem ser usados ​​no laboratório de microbiologia. Os mais utilizados são:

- Azul de metileno.

- violeta de cristal.

- verde malaquita.

- fucsina básica.

Todos esses corantes funcionam bem em bactérias porque possuem íons coloridos (cationicos) carregados positivamente (cromóforos).

Os tempos de coloração para a maioria destes corantes são relativamente curtos. Eles geralmente variam de 30 segundos a 2 minutos, dependendo da afinidade do corante.

É importante ter em mente que, antes de tingir uma amostra por simples coloração, ela deve ser estendida e fixada na lâmina de vidro (lâmina); A amostra estendida e fixa é chamada de esfregaço.

Os 6 passos para realizar uma simples coloração

Passo 1

Coloque o slide em um rack de coloração e aplique o corante desejado. Deixe agir o tempo correspondente.

Normalmente, a coloração simples leva alguns segundos ou alguns minutos, dependendo do corante usado.

Observação

Nesta etapa é importante não exceder o tempo recomendado para o corante utilizado, uma vez que os cristais poderiam se formar na folha, produzindo o que é conhecido como "artefatos" que distorcem a morfologia das células.

Passo 2

Lave com cuidado o esfregaço da lâmina com água destilada de uma garrafa, ou também com água da torneira que flui lentamente, até o escoamento se tornar transparente. Isso geralmente leva de 5 a 10 segundos.

Observação

Não aplique o fluxo de água diretamente no esfregaço, para evitar que a força do mesmo danifique a amostra.

Se você não tiver água destilada, poderá usar água da torneira sem problemas, pois isso não afetará o resultado da coloração.

Passo 3

Seque o slide com toalhas de papel absorvente em uma direção e sem esfregar. Certifique-se de que a parte inferior do slide esteja limpa.

Passo 4

Observe o esfregaço manchado no microscópio. Comece com os objetivos mais distantes para localizar corretamente a área que você deseja observar com mais detalhes. Mudança de objetivo para chegar mais perto e mais perto da amostra.

Observação

Para o uso da lente com a maior ampliação (normalmente 100X) deve-se usar óleo de imersão, já que ajuda a luz a penetrar melhor e a imagem mais nítida. Não é necessário usar uma lamela.

Passo 5

Por fim, descarte todas as amostras em um contêiner apropriado que esteja adequadamente rotulado como "risco biológico".

Referências

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