Tipos de testes bioquímicos, para que servem e importância

O testes bioquímicos em microbiologia são um conjunto de testes químicos realizados nos microrganismos presentes em uma amostra para identificá-los; Esses microorganismos são geralmente bactérias. Há um grande número de testes bioquímicos disponíveis para um microbiologista.

No entanto, a escolha destes testes é baseada em resultados preliminares, como o padrão de coloração de Gram e caracteres de crescimento, que permitem que as bactérias sejam atribuídas a uma categoria específica. Os testes bioquímicos são baseados principalmente nas propriedades metabólicas de cada tipo de bactéria.

Nem todas as bactérias têm as mesmas propriedades, por isso, é investigado se elas têm alguma enzima em particular, adicionando o substrato e aguardando que a reação ocorra. Comumente esta determinação é dada por uma mudança de cor ou pH no meio de cultura.

Frequentemente, são necessários menos de 15 testes bioquímicos para a identificação confiável de uma bactéria até o nível da espécie. A realização de mais testes bioquímicos pode aumentar a confiança na identificação.

A maioria desses testes bioquímicos é realizada no plasma sérico ou sanguíneo. No entanto, eles também podem ser realizados em outras secreções biológicas, tais como: urina, líquido cefalorraquidiano, líquido pleural e fezes, entre outros.

Índice

• 1 Classificação
  • 1.1 Universal
  • 1.2 Diferenciais
  • 1.3 específico
• 2 Tipos de testes bioquímicos
  • 2.1 O teste de catalase
  • 2.2 O teste da oxidase
  • 2,3 Teste de Agar Manitol Salgado (MSA)
  • 2,4 teste de coagulase
  • 2.5 O teste da urease
• 3 Quais são os testes bioquímicos para?
• 4 Importância
• 5 referências

Classificação

Os testes bioquímicos podem ser classificados em 3 grupos:

Universal

São os testes que podem ser realizados em qualquer amostra e que orientam o microbiologista nos seguintes testes bioquímicos que devem ser realizados para obter uma identificação confiável.

Exemplo

O teste da catalase e oxidase.

Diferenciais

Estes são os testes que são realizados para identificar os microrganismos presentes na amostra até o nível da espécie.

A identificação é feita com base nos resultados de uma combinação de testes, uma vez que os resultados individuais não são suficientemente informativos para fazer a identificação.

Exemplo

Testes IMViC e testes de utilização de açúcar.

Específico

São testes específicos para um determinado conjunto de espécies ou para subtipar uma espécie. Esses testes geralmente são feitos para confirmar ou identificar no nível de subespécies. Os testes individuais são informativos por si mesmos.

Exemplo

Teste de γ-glutamil aminopeptidase.

Tipos de testes bioquímicos

O teste de catalase

O teste da catalase é um teste para demonstrar a presença da enzima catalase pela decomposição do peróxido de hidrogênio em oxigênio e água. Uma pequena quantidade de bactérias é adicionada a uma gota de peróxido de hidrogênio (3%) na lâmina.

O teste de catalase é um teste simples usado por microbiologistas para ajudar a identificar espécies bacterianas e determinar a capacidade de alguns micróbios de decompor o peróxido de hidrogênio, produzindo a enzima catalase.

Se forem observadas bolhas de oxigênio, a bactéria possui a enzima catalase, porque catalisa a decomposição do peróxido de hidrogênio em oxigênio e água. É então dito que o organismo é catalase positivo (por exemplo: Staphylococcus aureus).

O teste da oxidase

Este teste é usado para identificar microorganismos que contêm a enzima citocromo oxidase (importante na cadeia de transporte de elétrons). É comumente usado para distinguir entre as famílias Enterobacteriaceae e Pseudomadaceae.

A citocromo oxidase transfere elétrons da cadeia de transporte de elétrons para o oxigênio (o aceptor de elétrons final) e os reduz para a água. No teste da oxidase são fornecidas doadoras artificiais e moléculas receptoras de elétrons.

Quando o doador de elétrons é oxidado pela ação da citocromo oxidase, o meio se torna roxo escuro e é considerado um resultado positivo. O microorganismo Pseudomonas aeruginosa é um exemplo de uma bactéria oxidase positiva.

Teste de Agar Manitol Salgado (MSA)

Este tipo de teste é seletivo e diferencial. A MSA selecionará organismos capazes de viver em ambientes com altas concentrações de sal, como espécies de Staphylococcus em contraste com as espécies de Estreptococo, cujo crescimento é inibido nestas condições.

O componente diferencial neste teste é o manitol de açúcar. Organismos capazes de usar manitol como fonte de alimento produzirão subprodutos de fermentação, que são ácidos e, portanto, reduzem o pH do meio.

A acidez do meio faz com que o indicador de pH, vermelho de fenol, fique amarelo. Exemplos de espécies bacterianas que podem ser diferenciadas por este método são: Staphylococcus aureus (positivo porque fermenta manitol) e Staphylococcus epidermidis (negativo porque o manitol não fermenta).

Teste de coagulase

A coagulase é uma enzima que ajuda a coagular o plasma sanguíneo. Este teste é realizado em bactérias positivas para gram-positivas e catalase-positivas para identificar Staphylococcus aureus (coagulase positiva). De fato, a coagulase é um fator de virulência dessa espécie bacteriana.

A formação de coágulos em torno de uma infecção causada por essa bactéria provavelmente a protege da fagocitose. Este teste é muito útil quando você quer diferenciar Staphylococcus aureus de outras espécies de Staphylococcus que são coagulase negativa

O teste da urease

Este teste é utilizado para identificar bactérias capazes de hidrolisar a uréia, utilizando a enzima urease. É comumente usado para distinguir gênero Proteus de outras bactérias entéricas.

A hidrólise da uréia produz amônia como um dos seus produtos. Esta base fraca aumenta o pH do meio acima de 8,4 e o indicador de pH (vermelho de fenol) muda de amarelo para rosa. Um exemplo de uma bactéria urease positiva é Proteus mirabilis.

Quais são os testes bioquímicos para?

Testes bioquímicos em microbiologia são usados ​​para diagnosticar doenças causadas por micróbios e monitorar tratamentos administrados para combatê-los. Além disso, eles são usados ​​para o rastreio de doenças infecciosas e para o seu prognóstico.

A identificação bioquímica de microrganismos oferece uma ideia do que esses microrganismos são capazes de fazer, sendo possível a discriminação de diferentes cepas da mesma espécie por perfis bioquímicos específicos.

Diferenças em atividades enzimáticas específicas informam sobre a ecologia, fisiologia ou habitat natural do microorganismo, que em alguns casos pode ser considerado informação importante.

Significado

As diferenças estruturais em relação à forma, tamanho e disposição das bactérias ajudam muito pouco no processo de identificação, porque existem muitas espécies de bactérias que têm forma, tamanho e disposição semelhantes.

Por esta razão, em última análise, a identificação de bactérias é baseada principalmente nas diferenças em suas atividades bioquímicas.

Cada espécie de bactéria possui um conjunto bem definido de atividades metabólicas diferentes de todas as outras espécies. Essas "impressões digitais" bioquímicas são propriedades controladas por enzimas bacterianas.

Assim, os exames bioquímicos são importantes porque auxiliam o pesquisador a identificar corretamente os patógenos presentes em uma amostra e, assim, poder recomendar o tratamento adequado ao paciente.

Referências

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